创新策略 | 低氧培养脐带间充质干细胞，促进周围神经损伤修复

间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs）是一类多能干细胞，具有自我更新和多向分化的能力，广泛存在于骨髓、脂肪、脐带等组织中，MSCs在组织损伤和再生过程中起重要作用，通过分化为多种细胞类型分泌多种细胞因子和微小胞外囊泡（sEVs），促进组织修复和再生。

研究背景 /

外周神经损伤（PNI）是常见的外科疾病，因机械撕裂、外部压迫和牵拉损伤等原因引起，PNI的治疗对神经功能恢复至关重要，现有的治疗方法包括神经缝合和自体神经移植，但这些方法存在神经功能丧失、疤痕形成和供体神经不足等问题。

世界上被引用次数最多的神经科学期刊《Frontiers in Cellular Neuroscience》最近刊登了来自北京大学研究团队的文章《缺氧培养脐带间充质干细胞衍生的sEVs可促进周围神经损伤修复》，团队深入研究了通过低氧培养脐带间充质干细胞（UC-MSCs）来源的sEVs对外周神经损伤（PNI）修复的影响，展示了其在促进外周神经再生方面的潜力。

研究方法 /

• 细胞培养：将UC-MSCs接种于培养瓶中，在37°C、5%CO2环境下培养48小时，然后，将细胞转移至3%O2低氧细胞培养箱中继续培养48小时；
• sEVs提取和鉴定：收集细胞上清液，去除死细胞和杂质后，使用0.45微米过滤器过滤上清液，然后，使用总外泌体提取试剂提取sEVs，并通过透射电子显微镜观察其形态，Western Blot检测其分子标志物（CD9、CD81、TSG101）；
• sEVs标记和摄取：使用绿色荧光标记试剂标记sEVs，随后与Schwann细胞共培养12小时，通过共聚焦激光扫描显微镜观察sEVs的摄取情况；
• 细胞增殖和迁移实验：使用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况，通过细胞划痕评估迁移能力；
• 动物实验：在小鼠模型中，诱导SNI，评估sEVs对PNI修复的效果；

研究结果 /

研究结果表明，低氧条件下培养的UC-MSCs来源的sEVs通过促进Schwann细胞的生长和迁移，加速了外周神经的修复和再生。低氧培养的UC-MSCs来源的sEVs可能成为PNI修复和再生的新型候选药物，未来研究可进一步探讨sEVs在其他神经损伤和组织再生中的应用潜力，推动其临床转化，具有重要的科学研究和临床应用价值。

图1：sEVs分泌量增加：低氧条件下培养的UC-MSCs分泌的sEVs显著增加。

图2：sEVs促进Schwann细胞生长和迁移：体外实验表明，低氧培养的sEVs被Schwann细胞摄取后促进了Schwann细胞的生长和迁移。

图3：小鼠模型中的PNI修复：在SNI小鼠模型中，低氧培养的sEVs显著促进了Schwann细胞在损伤部位的募集和外周神经的修复和再生。

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• 配备专业的旋风旋转闸彻底清除外界空气干扰，避免内腔环境扰动，使细胞稳定处于生理氧环境下，减少EPHOSS带来的影响；

• 采用新型材料电动可调遮光屏，解决低氧工作站操作阶段透明可视、培养阶段完全避光的需求，接近体内所处的无光环境。

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